Статья «МЕХАНИЗМЫ РЕАКТИВАЦИИ ДОРМАНТНЫХ ФОРМ и , "Вестник Центрального научно-исследовательского института туберкулеза"»

Хотя латентные формы микобактерий известны уже давно, их сущность остается плохо понятой. В нашем исследовании мы использовали in vitro модели дормантных («некультивируемых») клеток Mycobacterium smegmatis (mc155) и Mycobacterium tuberculosis H37Rv. Мы обнаружили, что добавление свободных ненасыщенных жирных кислот (FA), включая арахидоновую кислоту, вызывает активацию дормантных клеток M. smegmatis и M. tuberculosis в жидкой среде. Добавление FA повышает уровень цАМФ в реактивируемой M. smegmatis, а экзогенно добавленный цАМФ или дибутирил-цАМФ вместо FA активирует дормантные M. smegmatis и M. tuberculosis. Нуль-мутант M. smegmatis, не имеющий MSMEG_4279, который кодирует активируемую FA аденалилциклазу (AC), не может быть реактивирован FA, но реактивируется цАМФ. M. smegmatis и M. tuberculosis, гипер-экспрессирующие AC, не образуют дормантных форм, а специфический ингибитор AC (8-бром-цАМФ) предотвращал FA-зависимую реактивацию. Мы предлагаем новый путь реактивации дормантных микобактерий, включающий активацию аденилатциклазы MSMEG_4279 с помощью FAs, приводящую к активации клеточного метаболизма с последующим увеличением активности RpfA, который стимулирует размножение клеток в экспоненциальной фазе. Другим возможным триггером являются фрагменты микобактериального пептидогликана (PG), которые продемонстрировали стимулирующую активность в отношении реактивации дормантных M. smegmatis и M. tuberculosis. Было показано, что большие фрагменты PG (0,1-0,5 мкм) обладают реактивирующей активностью при добавлении к реактивирующей среде в концентрациях 0,1-0,2 мкг/мл. Предполагается, что фрагменты PG могут либо непосредственно активировать путь реактивации дормантных микобактерий, либо служить в качестве субстрата для эндогенного Rpf, в результате чего образуются продукты с низкой молекулярной массой с реактивирующей активностью. Эти эксперименты демонстрируют важность накопления свободной трегалозы для поддержания жизнеспособности спящих микобактерий и участия расщепления трегалозы в ранних событиях, приводящих к реактивации клеток, по механизму, сходному с работающим в спорах дрожжей и грибов.