Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «РЕКОМБИНАНТНАЯ ПРОДУКЦИЯ И ИССЛЕДОВАНИЕ СТРУКТУРЫ БЕЛКОВ ЧЕЛОВЕКА LYPD6 И LYPD6B1, "Биоорганическая химия"»

Авторы:
  • Парамонов А.С.1
  • Кульбацкий Д. С.2
  • Локтюшов Е.В.3
  • Царев А. В.4
  • Долгих Д.А.5
  • Шенкарёв З. О.6
  • Кирпичников М.П.7
  • Люкманова Е.Н.8
стр. 620-630
Платно
1 Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 2 ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН; МГУ имени М.В. Ломоносова, 3 Пущинский государственный естественно-научный институт, Пущино, Московская обл., 4 ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН; Московский физико-технический институт (государственный университет), 5 ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН, 117?997, Москва, ул. Миклухо-Маклая, 16/10, 6 ФГБУН Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН; Московский физико-технический институт (государственный университет), 7 Московский государственный университет им. М.В. Ломоносова, 8 Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН
Ключевые слова:
  • Lypd6
  • Lypd6b
  • Ly6/uPAR
  • никотиновый ацетилхолиновый рецептор
  • трехпетельный белки
  • ЯМР-спектроскопия
  • Lypd6
  • Lypd6b
  • Ly6/uPAR
  • nicotinic acetylcholine receptor
  • three-finger proteins
  • NMR spectroscopy
Аннотация:
Белки человека Lypd6 и Lypd6b экспрессируются во многих тканях и имеют высокую степень гомологии аминокислотной последовательности (~ 54%). Оба белка в отличие от других белков семейства Ly6/uPAR имеют дополнительные протяженные N- и С-концевые аминокислотные последовательности, примыкающие к трехпетельному LU-домену, роль которых на данный момент не изучена. Известно, что Lypd6 увеличивает амплитуду токов кальция, индуцированных никотином в нейронах тройничного нерва мыши. Lypd6 рыбки Danio rerio участвует в регуляции Wnt/?-катенин сигнального каскада, и блокирование экспрессии гена lypd6 приводит к нарушению эмбрионального развития. Экспрессия Lypd6b в ооцитах X. laevis повышает чувствительность никотиновых ацетилхолиновых рецепторов к ацетилхолину и увеличивает скорость их десенситизации. Молекулярные механизмы действия, равно как и пространственная структура Lypd6 и Lypd6b, до сих пор не изучены. В представленной работе получены и экспрессированы гены водорастворимых аналогов трехпетельных белков человека Lypd6 и Lypd6b, не содержащих N-концевые последовательности (rLypd6 и rLypd6b), а также Lypd6 с N-концевой последовательностью - N-rLypd6. Белки получали в виде цитоплазматических телец включения в E. coli с последующей солюбилизацией в денатурирующих условиях и ренатурацией. С целью оптимизации выхода рекомбинантных белков был проведен поиск условий ренатурации. Анализ полученных препаратов N-rLypd6, rLypd6 и rLypd6b методами ЯМР-спектроскопии показал, что N-rLypd6, возможно, не структурирован. Получение миллиграммовых количеств изотопно-меченных вариантов rLypd6 и rLypd6b позволило охарактеризовать вторичную структуру этих белков и исследовать внутримолекулярную подвижность. Установлено, что rLypd6 и rLypd6b обладают структурными элементами, характерными для трехпетельных белков семейства Ly6/uPAR с некоторыми уникальными особенностями, такими как наличие дополнительной дисульфидной связи в третьей петле и спиральных участков в первой и третьей петлях.

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.