Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста
Войти / Регистрация
Корзина

  • Ваша корзина пуста

Статья «СКАНИРОВАНИЕ МУТАЦИИ KRAS, NRAS, BRAF И PIK3CA МЕТОДОМ ПЛАВЛЕНИЯ ДНК C ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ЗОНДОВ TaqMan, "Молекулярная биология"»

Авторы:
  • Ботезату И.В.1
  • Панчук И. О.2
  • Строганова А. М.3
  • Сендерович А. И.4
  • Кондратова В.Н.5
  • Шелепов В.П.6
  • Лихтенштейн А.В.7
стр. 50-58
Платно
1 Научно-исследовательский институт канцерогенеза Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина Российской академии медицинских наук, Москва, 115478, 2 Научно-исследовательский институт канцерогенеза Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина Министерства здравоохранения Российской Федерации, 3 Научно-исследовательский институт канцерогенеза Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина Министерства здравоохранения Российской Федерации, 4 Научно-исследовательский институт канцерогенеза Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина Министерства здравоохранения Российской Федерации, 5 Российский онкологический научный центр им. Н.Н. Блохина Российской академии медицинских наук, Москва 115478, 6 Научно-исследовательский институт канцерогенеза Российского онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина Российской академии медицинских наук, Москва, 115478, 7 НИИ канцерогенеза, ФГБУ «РОНЦ им. Н.Н. Блохина» РАМН
Ключевые слова:
  • ПЦР
  • сканирование мутаций
  • плавление ДНК
  • зонды TaqMan
  • мультиплексный анализ
  • KRAS
  • NRAS
  • BRAF
  • PIK3CA
  • PCR
  • mutation scanning
  • DNA melting
  • TaqMan probes
  • multiplex analysis
Аннотация:
Метод мутационного сканирования посредством плавления ДНК (DNA Melting Analysis, DMA) основан на использовании асимметричной ПЦР и последующего плавления дуплексов однонитевых ампликонов с зондами TaqMan. По основным параметрам: простота исполнения, высокая производительность и чувствительность - метод оптимально подходит для применения в клинической генодиагностике. Предел обнаружения мутантных аллелей методом DMA составляет приблизительно 3%, что намного выше чувствительности секвенирования по Сэнгеру. Кроме того, метод DMA реализуется в “закрытом формате”: 2-часовой анализ проводят в одной пробирке без каких-либо промежуточных или дополнительных процедур, что сводит к минимуму риск перекрестного загрязнения образцов. Апробация метода DMA проведена сканированием мутаций клинически значимых генов KRAS, NRAS, BRAF и PIK3CA в 324 образцах ДНК из опухолей больных меланомой, раком толстой кишки и раком легкого. ДНК выделяли или непосредственно из опухолевой ткани или из опухолевой ткани, фиксированной формальдегидом и заключенной в парафиновые блоки. Обнаруженные мутации верифицированы секвенированием по Сэнгеру. Спектры мутаций, выявленные в каждом типе опухолей, соответствуют данным литературы и, тем самым, валидизируют применение DMA.

Архивные статьи (2015 год и ранее) доступны для ознакомления бесплатно, для скачивания их необходимо приобрести. Для просмотра материалов необходимо зарегистрироваться и авторизоваться на сайте.

Чтобы приобрести доступ к материалу для юридического лица, пожалуйста, свяжитесь с администрацией портала с помощью формы обратной связи либо по электронному адресу libnauka@naukaran.com.  

Действия с материалами доступны только авторизованным пользователям.